（一）指標和方法學納入標準

《意見》中涉及的抗體綜合了專家委員會意見討論，均為國內普遍使用、具有重要診斷價值的自身抗體以及衛生部臨床檢驗中心室間質評涉及的自身抗體。參評方法學為國家藥品監督管理局室間質評涉及的、國內已上市且廣泛使用的以及臨床文獻中的常見方法學。

（二）參考文獻證據級別評價標準

參考文獻證據級別共5級：I級(最高證據)，使用盲法的大樣本（≥200）隨機對照方法學研究及方法學薈萃分析；II級，使用盲法的小樣本（<200）隨機對照方法學研究，或未使用盲法的隨機對照方法學研究，或采用有效替代標志物的隨機對照方法學研究；III級，應用相應方法的非隨機對照研究，觀察性（隊列）研究，病例對照研究或橫斷面研究；IV級，專家委員會或相關的意見；V級，專家意見。

（三）專家評分標準及統計標準

專家認可度評分按Delphi評分進行打分，0分表示非常不贊同，10分表示非常贊同（0-2分反對，3-4分不推薦，5-6分酌情推薦，7-8分推薦，9-10分強烈推薦）。統計后評分平均值<7分或未收到半數以上專家評價的指標和對應方法學視為抗體檢測方法學未形成共識予以排除。《意見》打分表發出48份，收回38份，有效38份。

自身抗體檢測方法專家認可度評分和專家， 推薦

（內分泌系統疾病相關自身抗體）

《意見》中，對內分泌系統疾病相關自身抗體包括甲狀腺疾病相關自身抗體、糖尿病相關自身抗體檢測的推薦方法，見下表。

甲狀腺疾病相關自身抗體：作用靶器官為甲狀腺，是自身免疫性甲狀腺疾病的重要診斷依據。

• 抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）：與抗甲狀腺球蛋白抗體聯合檢測是診斷自身免疫性甲狀腺炎的重要依據。建議采用化學發光免疫分析法（CLIA）或酶聯免疫吸附分析法（ELISA）檢測。

   

• 抗甲狀腺球蛋白抗體：主要用于疑似橋本甲狀腺炎患者的診斷，常與TPOAb同時檢測，也可作為產后甲狀腺炎、無痛性Graves病等甲狀腺疾病診斷的參考指標。建議檢測方法是CLIA或ELISA。

   

• 抗促甲狀腺激素受體抗體：是Graves病診斷標志，靈敏度約為90%，特異度可達99%，并且抗體水平還可作為預后和治療的重要參考。建議采用CLIA、電化學發光免疫分析法（ECLIA）或ELISA檢測。

糖尿病相關自身抗體：識別胰島β細胞不同抗原成分，是評估胰島β細胞是否存在免疫損害及疾病診斷分型的重要指標。

• 抗胰島細胞抗體（ICA）：用于確診1型糖尿病（type 1 diabetes mellitus，T1DM）。ICA分析結果受不同的胰腺組織、標記方法、孵育時間、濕度以及不同生物學家的解釋等因素影響波動較大，因此ICA是檢測難度最大且方法學難以標準化的胰島自身抗體。建議選以靈長類胰腺冰凍組織切片為基質的間接免疫熒光法（IIFT）檢測，也可采用ELISA檢測。

   

• 抗酪氨酸磷酸酶（IA2）抗體：胰島自身免疫活動的早期標志物，可作為T1DM、成人隱匿性自身免疫性糖尿病（LADA）的血清學診斷指標。抗IA2抗體的出現預示病情進展迅速，對T1DM診斷、預測及治療監控有重要臨床意義。建議采用CLIA、ELISA或放射免疫分析法（RIA）檢測。

   

• 抗谷氨酸脫羧酶（GAD）抗體：出現早且持續時間長，是診斷T1DM和LADA最敏感的免疫指標，在年齡較大T1DM兒童患者和遲發型患者中多見，在神經系統自身免疫性疾病中也可起到輔助診斷的作用。GAD抗體水平在LADA患者中可反映病程及胰島素分泌功能的衰退情況，高抗體水平的LADA患者應及早進行胰島素治療以保留殘存β細胞功能。對T1DM、LADA擬診患者建議采用ELISA或線性免疫印跡（LIA）檢測。其中ELISA法檢測抗谷氨酸脫羧酶抗體的優異性能擁有I級(最高證據)數據支持。

   

  抗GAD抗體也可見于僵人綜合征患者體內，靶抗原GAD是γ-氨基丁酸（GABA）合成的關鍵限速酶，主要表達于腦灰質、胰島β細胞等組織和細胞中。除對神經系統自身免疫性疾病有輔助診斷價值外，抗GAD抗體還是I型糖尿病的重要檢測指標。由于僵人綜合征患者和部分小腦共濟失調患者的抗體水平顯著高于糖尿病患者，故高水平的抗GAD抗體對僵人綜合征等神經系統自身免疫性疾病的診斷有特殊意義。該抗體也見于部分患有邊緣性腦炎的胸腺瘤、小細胞肺癌患者。對擬診神經系統自身免疫病患者，建議采用以靈長類小腦為基質的IIFT篩查，使用ELISA或LIA確認靶抗原。

   

• 抗胰島素抗體（IAA）是T1DM的免疫學指標之一，在2型糖尿病（T2DM）患者中陽性率較低，也見于部分甲狀腺疾病。建議采用CLIA或ELISA檢測，應注意現有檢測方法不能區分疾病相關的IAA還是因注射外源性胰島素而產生的IAA。

對于GAD抗體檢測的來說，基于的設計原理不同，ELISA法試劑盒的性能會有差異。由佛羅里達大學牽頭開展的國際多中心自身免疫糖尿病抗體檢測標準化項目(ISAP)中，橋聯ELISA法的檢測性能*佳。雙抗原夾心橋聯ELISA法是傳統酶標二抗間接ELISA法的升級，借助生物素-鏈霉親和素等信號放大系統和抗原空間位點的充分暴露，大大提高了對GAD65抗體的檢測靈敏度，使橋聯ELISA法可作為傳統放射免疫法的替代方案。

在另一項來自英國的隊列研究中，RSR的橋聯ELISA檢測試劑盒也實現了GAD65抗體實驗室檢測方法的大幅升級：

該隊列研究納入了2006至2012年羅姆福德queen醫院和royal倫敦醫院兩家兒童糖尿病中心的316名兒童糖尿病患者，經至少兩項自身抗體檢測后296名(93.7%)兒童確診為1型糖尿病。

在GAD抗體檢測中，2011年12月前入組患者使用實驗室自建檢測法(ELISA和猴小腦切片間接免疫熒光），陽性率分別為18.4%和13.8%。2012年1月改用RSR 橋聯ELISA法檢測試劑盒后，抗體陽性率提升至66.7%。可見，RSR橋聯 ELISA試劑盒的靈敏性遠超實驗室方法。

作為對2014 年版《自身抗體檢測在自身免疫病中的臨床應用專家建議》的全面修訂，2020年版《推薦意見》涵蓋了內分泌系統自身免疫疾病等多系統自身免疫疾病自身抗體的檢測方法學推薦，可作為臨床醫師和檢驗人員選擇自身抗體檢測方法學的參考。以橋聯ELISA為代表的RSR產品除服務于甲狀腺自身免疫領域外，在自身免疫糖尿病領域已實現對傳統放射免疫法和實驗室非標準化方法的全面替代，可作為內分泌科特檢實驗室和檢驗科的高效選擇。

參考文獻：

1. 中國免疫學會臨床免疫分會專家組. 自身免疫病診斷中抗體檢測方法的推薦意見[J]. 中華檢驗醫學雜志 2020年43卷9期, 878-888頁, ISTIC PKU CSCD CA, 2020.

2. 黃干, 楊濤, 劉煜, 等.   中國胰島自身抗體檢測標準化計劃報告：檢測方法調查及準確性評估 [J] . 中華糖尿病雜志,2016,8 (12): 723-728.

3. Perchard R, MacDonald D, Say J, et al. Islet autoantibody status in a multi-ethnic UK clinic cohort of children presenting with diabetes. Arch Dis Child. 2015;100(4):348-352.